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目的基因的检测与鉴定

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目的基因的检测与鉴定

目的基因的检测与鉴定

DNA分子杂交技术(检测目的基因) 分子杂交技术(检测mRNA) 抗原抗体杂交技术(检测蛋白质)

目的基因的检测与鉴定过程是什么?

目的基因的检测是看看目的基因进入受体细胞没,所以先利用基因探针检查受体细胞中是否含有目的基因;其次需要考虑,受体细胞中有了目的基因后是否能顺利转录,因此还是基因探针来检查信使RNA;含有信使RNA后还得考虑是否能翻译形成蛋白质,利用抗原-抗体杂交来检测蛋白质。最后,考试中经常考察最后的一步,有了蛋白质后是否就有了满意的性状,即个体生物学水平上的检测,例如,我国的抗虫棉经过了多次基因改造后才得到我们满意的性状。

目的基因的监测与鉴定

有关DNA分子杂交技术一楼的解释就很完善,我只补充一下有关高中教材上的目的基因的监测与鉴定部分所用的DNA分子杂交技术:此时所用的基因探针就是目的基因的一条链(用同位素标记),然后把待测细胞的基因组DNA提取出来,并解旋成单链,然后让探针与解旋后的基因组DNA单链杂交,如果能完全杂交(即不出现游离双链区),我们就认为出现杂交带,并以此来判定目的基因导入成功。

所谓出现杂交带就是指杂交带部分的两条链上所有碱基能完全按照碱基互补配对原则严格配对形成氢键紧密结合在一起。

抗原—抗体杂交技术是用来检测目的基因是否成功表达(翻译)出相应蛋白质的方法,此时目的基因合成的蛋白质可以充当抗原,用能与这种抗原蛋白特异性结合的蛋白质充当抗体来检测,如果受体细胞提取的蛋白质能与这种抗体杂交(即特异性结合)我们就认为目的基因表达成功。你所说的探针应该就是这种抗体(这只是一般情况,反过来让目的基因合成的蛋白质充当抗体,用能与这种抗体蛋白特异性结合的蛋白质充当抗原亦可,此时探针就是抗原)。只是探针通常是在DNA分子杂交技术中提到,抗原—抗体杂交技术一般不提。

如何对目的基因进行检测与鉴定

可以从三方面对目的基因进行鉴定:

1、直接测定:按照目的基因组成制作DNA分子探针进行配对。

2、mRNA测定:根据目的基因组得出其转录的mRNA组成,利用探针检测。

3、蛋白测定:可应用PCR相应技术测定目的基因翻译的相关蛋白,也可采用免疫化学法导入蛋白抗体检测蛋白。

扩展资料:

对目的基因进行鉴定和检测的多种方法:

基因鉴定技术是一项生物学检测技术,人体细胞有总数约为30亿个碱基对的DNA,每个人的DNA都不完全相同,人与人之间不同的碱基对数目达几百万之多,因此通过分子生物学方法显示的DNA图谱也因人而异,由此可以识别不同的人。

所谓“DNA指纹”,就是把DNA作为像指纹那样的独特特征来识别不同的人。由于DNA是遗传物质,因此通过对DNA鉴定还可以判断两个人之间的亲缘关系。

基因鉴定的原理其实是DNA分子杂交,这种分子杂交是在缓冲液中进行的,由于DNA分子杂交时,两个分子相遇的机会不是很大,所以就需要众多的带有目的基因的DNA与待测的DNA分子。

而PCR技术就是将目的基因进行扩增的一种技术手段,所以在进行基因鉴定时并不是直接进行鉴定的,而是先进行PCR技术将目的基因扩增再进行鉴定。

参考资料:

百度百科-对目的基因进行检测与鉴定

高二生物中的目的基因的检测与鉴定

目的基因的检测与鉴定分分子水平检测和个体水平鉴定。

个体水平鉴定简单说就是把导入了目的基因的生物体培养出来,看生物个体中是否能表达出你所需要的性状。

分子水平检测就相当麻烦了,它有三个步骤。

首先,要检测转基因生物的DNA上是否插入了目的基因。方法是采用DNA分子杂交技术,即将转基因生物的基因组DNA提取出来,同时,在外面(像基因文库中)取一段新的含有目的基因的DNA片段,用放射性同位素等作标记,以此来作为探针,将探针与基因组DNA杂交,来检测。(实际上就是DNA复制的情况,DNA复制时,一条双链的DNA分子解旋成了两条单链的DNA,而探针也是一条双链的DNA片段解旋成了两条单链的DNA片段,因为探针上也有目的基因,基因组的DNA上也有目的基因,在重新形成新的2条DNA,也就是复制时,碱基互补配对,则含目的基因的探针上的单链能与同样含目的基因的基因组DNA单链配对,形成一条新的DNA双链分子,一旦形成新的DNA分子后,放射性标记能在新的DNA分子中含目的基因处发出荧光,从而表明目的基因已导入。)

其次,就是大大你说的检测目的基因是否转录出了mRNA,方法和上面一样,但不同之处是,从转基因生物中提取出的是mRNA,同样,同时,在外面(像基因文库中)取一段新的含有目的基因的DNA片段,用放射性同位素等作标记,以此来作为探针,将探针与mRNA杂交,来检测。(这里实际上和DNA的转录翻译有点像,毕竟mRNA是单链的,实际上是探针DNA解旋成两条单链的DNA片段,就像转录一样,这时的mRNA会与单链的DNA碱基互补配对,显现出标记的同位素荧光,表明mRNA上有目的基因。)所以说,mRNA与目的基因杂交,是和DNA杂交,不是mRNA与目的基因的转录出的mRNA杂交。

最后要检验的就是看目的基因能否翻译成蛋白质,就不多说了。

不知道讲的清不清楚,语文表达有限,希望你能理解啊。

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