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诱变育种的过程是什么 诱变育种的基本环节

BETTY

诱变育种的过程是什么 诱变育种的基本环节

诱变育种的具体步骤

诱变育种程序:

1、处理材料的选择

2、诱变剂量的选择

3、处理群体的大小 一般根据突变率和M2群体大小来确定处理材料群体的大小

4、后代种植和选择 1.M1的种植与处理 2.M2及后代的种植和选择(1系谱法 2混合法)

诱变育种的基本步骤有哪些?关键是什么

决策包括 .1 分析整体情况.判定方向及目标.2 掌握过程周到细腻 3 反复审查 计划不足之处.关键在于 分析总体情况.判定方向 在拟定计划时 做好周到 细腻..

诱变育种的步骤

具体步骤如下:

   经诱变处理产生的诱变一代,以M1表示。由于受射线等诱变因素的抑制和损伤,M1的发芽率、出苗率、成株率、结实率一般较低,发育延迟,植株矮化或畸形,并出现嵌合体。但这些变化一般不能遗传给后代。诱变引起的遗传变异多数为隐性,因此M1一般不进行选择,而以单株、单穗或以处理为单位收获。

诱变二代(M2)是变异最大的世代,也是选择的关键时期,可根据育种目标及性状遗传特点选择优良单株(穗)。多数变异是不利的,但也能出现早熟、杆矮、抗病、抗逆、品质优良等有益变异,变异频率约为0.1~0.2%。

诱变三代(M3)以后,随着世代的增加,性状分离减少,有些性状一经获得即可迅速稳定。经过几个世代的选择就能获得稳定的优良突变系,再进一步试验育成新品种。具有某些突出性状的突变系,还可用作杂交亲本。

希望能帮助您。^__^

简述诱变育种的操作方法和步骤!

一、实验目的和内容目的:以紫外线诱变获得用于酱油生产的高产蛋白酶菌株为例,学习微生物诱变育种的基本操作方法。内容:1.对米曲霉(Aspergillsoryzae)出发菌株进行处理,制备孢子悬液。2.用紫外线进行诱变处理。3.用平板透明圈法进行两次初筛。4.用摇瓶法进行复筛及酶活性测定。二、实验材料和用具米曲霉斜面菌种;豆饼斜面培养基、酪素培养基、蒸馏水、0.5%酪蛋白;三角瓶(300mL、500mL)、试管、培养皿(9cm)、恒温摇床、恒温培养箱、紫外照射箱、磁力搅拌器、脱脂棉、无菌漏斗、玻璃珠、移液管、涂布器、酒精灯。三、操作步骤(一)出发菌株的选择及菌悬液制备1.出发菌株的选择可直接选用生产酱油的米曲霉菌株,或选用高产蛋白酶的米曲霉菌株。2.菌悬液制备取出发菌株转接至豆饼斜面培养基中,30℃培养3~5d活化。然后孢子洗至装有1mL0.lmol/LpH6.0的无菌磷酸缓冲液的三角瓶中(内装玻璃珠,装量以大致铺满瓶底为宜),30℃振荡30min,用垫有脱脂棉的灭菌漏斗过滤,制成把子悬液,调其浓度为106~108个/mL,冷冻保藏备用。(二)诱变处理用物理方法或化学方法,所用诱变剂种类及剂量的选择可视具体情况决定,有时还可采用复合处理,可获得更好的结果。本实验学习用紫外线照射的诱变方法。1.紫外线处理打开紫外灯(30W)预热20min。取5mL菌悬液放在无菌的培养皿(9cm)中,同时制作5份。逐一操作,将培养皿平放在离紫外灯30cm(垂直距离)处的磁力搅拌器上,照射lmin后打开培养皿盖,开始照射,与照射处理开始的同时打开磁力搅拌器进行搅拌,即时计算时间,照射时间分别为15s、30s、lmin、2min、5min。照射后,诱变菌液在黑暗冷冻中保存1~2h然后在红灯下稀释涂菌进行初筛。2.稀释菌悬液按10倍稀释至10-6,从10-5和10-6中各取出0.lmL加入到酪素培养基平板中(每个稀释度均做3个重复),然后涂菌并静置,待菌液渗入培养基后倒置,于30℃恒温培养2~3d。(三)优良菌株的筛选1.初筛首先观察在菌落周围出现的透明圈大小,并测量其菌落直径与透明圈直径之比,选择其比值大且菌落直径也大的菌落40~50个,作为复筛菌株。2.平板复筛分别倒酪素培养基平板,在每个平皿的背面用红笔划线分区,从圆心划线至周边分成8等份,1~7份中点种初筛菌株,第8份点种原始菌株,作为对照。培养48h后即可见生长,若出现明显的透明圈,即可按初筛方法检测,获得数株二次优良菌株,进大摇瓶复筛阶段。3.摇瓶复筛将初筛出的菌株,接入米曲霉复筛培养基中进行培养,其方法是,称取麦秩85g,豆饼粉(或面粉)15g,加水95~110mL(称为润水),水含量以手捏后指缝有水而不下滴为宜,于500mL三角瓶中装入15~20g(料厚为1~1.5cm),121℃湿热灭菌30min,然后分别接入以上初筛获得的优良菌株,30℃培养,24h后摇瓶一次并均匀铺开,再培养24~48h,共培养3~5d后检测蛋白酶活性。4.蛋白酶的测定方法(1)取样:培养后随机称取以上摇瓶培养物1g,加蒸馏水100mL,(或200mL),40℃水浴,浸酶1h,取上清浸液测定酶活性。另取lg培养物于105℃烘干测定含水量。(2)酶活性测定:30℃pH7.5条件下水解酪蛋白(底物为0.5%酪蛋白),每分钟产酪氨酸1μg为一个酶活力单位。计算公式为:(A样品OD680nm值-A对照OD680nm值)×K×V/t×NK:标准曲线中光吸收为“1”时的酪氨酸微克数;V:酶促反应的总体积;t:酶促反应时间(min);N:酶的稀释倍数。5.谷氨酸的检测此项检测也是酱油优良菌株的重要指标之一。检测培养基:豆饼粉:麸夫=6:4,润水75%,121℃湿热灭菌30min。谷氨酸测定:于以上培养基中加入7%盐水(W/V),40~45℃水浴,水解9d后过滤,以滤液检测谷氨酸含量(测压法)。四、注意事项1.紫外线照射时注意保护眼睛和皮肤。2.诱变过程及诱变后的稀释操作均在红灯下进行,并在黑暗中培养。五、实验报告1.试列表说明高产蛋白酶菌株的筛选过程和结果。2.你认为以上的筛选方法有什么优缺点,如何改进?六、问题和思考1.试述紫外线诱变的作用机理及其在具体操作中应注意的问题。2.为什么在诱变前要把菌悬液打散和培养一段时间?注:筛选菌株数的计算若按突变率为0.01计算,则一次筛选可取250—300个菌落,第一次筛选后可多选几株高产株,而二级筛选为重点阶段,其最适量可参考以下计算方法:如初筛菌株数为200株,二次筛选欲选株数为2株,则二级应选(200×2)1/2,为20株,这样的数量选择,使有可能从较少的数量中获得相对较多的优良菌株。

简述微生物诱变育种的步骤

紫外线是一种最常用有效的物理诱变因素,其诱变效应主要是由于它引起DNA结构的改变而形成突变型。紫外线诱变,一般采用15W或30W紫外线灯,照射距离为20-30cm,照射时间依菌种而异,一般为1-3min,死亡率控制在50%-80%为宜。被照射处理的细胞,必须呈均匀分散的单细胞悬浮液状态,以利于均匀接触诱变剂,并可减少不纯种的出现。同时,对于细菌细胞的生理状态则要求培养至对数期为最好

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